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簡述螺旋體IgGelisa試劑盒陰性本底的形成原因

發布時間: 2022-11-07  點擊次數: 121次
  螺旋體IgGelisa試劑盒是指以酶作為標記物、以抗原和抗體之間免疫結合反應為基礎的固相吸附測定方法。因此,一個測定試劑,其有機組成部分包括:包被的抗原或抗體的固相支持物,即聚苯乙烯塑料微孔或試管;酶標記的抗體或抗原和酶的反應底物等。
 
  在螺旋體IgGelisa試劑盒實驗中,偶爾會遇到樣品濃度挨近試劑盒的靈敏度就容易發生樣本OD450值低于空白值的現象,特別是在血清和血漿樣本中。這就有可能是基質效應導致的結果。
 
  首先我們要知道什么是基質,基質是指樣品中目標分析物以外的部分。由于基質成分會對分析過程有顯著干擾,影響分析結果的準確性。業內把這些影響統稱為基質效應,這是該產品開發和使用中需要避開的雷。
 
  今天我們就談談螺旋體IgGelisa試劑盒中陰性本底的形成原因。酶聯固相免疫實驗中,尤其在簡介ELISA法中,經常會碰到陰性本底的問題。主要是本底過高和不同標本的本底值差異較大。本底或稱背景,是ELISA中的非特異性顯色。底物未經過酶作用而呈現的顏色稱為空白。底物液如配制不當會出現一定的空白值。這個空白值只要不太高(A<0.05),可從個測定值中減除,并不影響實驗結果。這里研究的是不含待測抗原或抗體的陰性標本在ELISA中出現的本底。
 
  在酶免疫測定中,其特點是利用固相載體作為分離游離和結合的酶結合物的手段。固相載體與吸附在其上的抗原會抗體形成固相抗原或固相抗體,即免疫吸附劑。通常所用的固相載體聚苯乙烯其表面主要是疏水基團,通過疏水鍵與蛋白質結合。其中吸附式物理性的非特異性吸附,雖然蛋白質的分子量、等電點、濃度等對吸附的量有一定的影響,但總的來說各種蛋白質均能吸附在聚苯乙烯載體的表面。

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