熱休克蛋白elisa試劑盒在使用過程中常見的問題分享

 　　熱休克蛋白elisa試劑盒以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。

 

　　今天咱們來聊一聊熱休克蛋白elisa試劑盒在使用過程中常見的問題：

 

　　1、在使用過程中檢查加樣器：使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

 

　　2、洗滌用水不規范：從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶，屬于正?，F象，微加熱至40℃使結晶*溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。

 

　　3、加樣不準確：應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

 

　　那么又有哪些因素會導致其測定錯誤呢？

 

　　1、樣品稀釋

 

　　一般產品的樣品稀釋倍數均通過大量試驗確定，以保證試驗的靈敏度和特異性。酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應，如果血清不稀釋，不可避免會產生很強的非特異性反應，出現假陽性。

 

　　2、試劑盒平衡

 

　　Elisa中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫(約25℃)，一般需在室溫放置20～30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠，樣品孵育時間相對縮短，ELISA反應不夠充分。冬季室溫低，可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。